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德雷特 DLG-160AT 應(yīng)用方案:實(shí)驗(yàn)室生物樣品高速分離的標(biāo)準(zhǔn)化落地指南
上海儀器網(wǎng) / 2025-09-26
德雷特 DLG-160AT 作為臺(tái)式高速離心機(jī)的代表性設(shè)備,憑16000r/min 最高轉(zhuǎn)速、23669xg 最大離心力及可編程運(yùn)行系統(tǒng),成為生物樣品分離的核心工具。其微機(jī)控制的直流無刷電機(jī)確保轉(zhuǎn)速精度達(dá) ±30r/min,9 種升速曲線與 10 種降速曲線的靈活配置,可適配核酸提取、細(xì)胞分離、蛋白純化等多場景需求。本文基于設(shè)備特性與實(shí)驗(yàn)規(guī)范,提供 “設(shè)備調(diào)試 - 場景操作 - 質(zhì)量控制 - 維護(hù)保障” 全流程標(biāo)準(zhǔn)化方案,實(shí)現(xiàn)生物樣品分離的高效與精準(zhǔn)。?
一、設(shè)備基礎(chǔ)適配與開機(jī)調(diào)試:分離前的核心準(zhǔn)備?
DLG-160AT 的穩(wěn)定運(yùn)行是分離成功的前提,需嚴(yán)格執(zhí)行 “環(huán)境適配 - 部件檢查 - 參數(shù)校準(zhǔn)” 三步調(diào)試法,確保設(shè)備處于最佳工作狀態(tài)。?
(一)環(huán)境與安裝適配?
  1. 環(huán)境要求:需放置在水平穩(wěn)固的實(shí)驗(yàn)臺(tái)(承重≥50kg),四周預(yù)留≥10cm 通風(fēng)空間,避免陽光直射及腐蝕性氣體侵蝕。環(huán)境溫度控制在 5-35℃,相對(duì)濕度≤80%,且遠(yuǎn)離強(qiáng)電磁干擾源(如高壓電泳儀),防止轉(zhuǎn)速波動(dòng)。?
  1. 安裝規(guī)范:使用水平儀校準(zhǔn)設(shè)備水平(氣泡居中),通過調(diào)節(jié)底部腳墊消除晃動(dòng);電源需接入獨(dú)立 220V/50Hz 插座(接地電阻<4Ω),避免與其他大功率設(shè)備共用線路,防止電壓不穩(wěn)觸發(fā)過載保護(hù)。?
(二)核心部件檢查?
  1. 轉(zhuǎn)子適配:標(biāo)配 6×50mL 角轉(zhuǎn)子(適配 50mL 離心管),可根據(jù)需求選配 1.5mL/2mL 微量轉(zhuǎn)子或 96 孔板轉(zhuǎn)子。安裝轉(zhuǎn)子時(shí)需用專用扳手?jǐn)Q緊,確保轉(zhuǎn)子底部定位銷與主軸凹槽完全契合,防止離心時(shí)產(chǎn)生偏心振動(dòng)。?
  1. 密封與安全檢查:檢查機(jī)門食用級(jí)硅橡膠密封圈是否完整無破損,閉合門蓋后電子門鎖應(yīng)自動(dòng)鎖定(指示燈常亮);測試不平衡檢測功能 —— 向?qū)ΨQ離心管中加入 5mL 差異液體,開機(jī)后設(shè)備應(yīng)立即報(bào)警并停機(jī),驗(yàn)證保護(hù)機(jī)制有效。?
(三)開機(jī)與參數(shù)校準(zhǔn)?
  1. 開機(jī)自檢:接通電源后,設(shè)備自動(dòng)進(jìn)入自檢模式(3 秒),液晶屏顯示 “DLG-160AT” 及版本信息,無報(bào)錯(cuò)提示方可繼續(xù)操作。若顯示 “ERR-01”(門蓋未關(guān))或 “ERR-03”(不平衡),需排查對(duì)應(yīng)問題后重啟。?
  1. 參數(shù)校準(zhǔn)?
  • 轉(zhuǎn)速校準(zhǔn):使用光電轉(zhuǎn)速計(jì)對(duì)準(zhǔn)轉(zhuǎn)子中心標(biāo)記,設(shè)定轉(zhuǎn)速 5000r/min,實(shí)測值與設(shè)定值偏差應(yīng)≤±30r/min,超差需聯(lián)系售后調(diào)節(jié)電機(jī)參數(shù);?
  • 時(shí)間校準(zhǔn):設(shè)定離心時(shí)間 1min,實(shí)際運(yùn)行時(shí)間誤差應(yīng)<2 秒,確保定時(shí)精準(zhǔn)。?
二、三大核心場景標(biāo)準(zhǔn)化操作:從樣品到分離的精準(zhǔn)落地?
針對(duì)生物樣品的不同特性,結(jié)合 DLG-160AT 的參數(shù)優(yōu)勢(shì),定制差異化操作流程,兼顧分離效率與樣品活性。?
(一)核酸提取場景:高離心力下的純度保障?
核酸分離需通過梯度離心去除蛋白雜質(zhì),DLG-160AT 的 23669xg 離心力可實(shí)現(xiàn)核酸與蛋白的高效分層,尤其適用于細(xì)菌 DNA、質(zhì)粒 DNA 提取。?
1. 適配參數(shù)配置?
?
步驟?
 
 
 
 
離心目的?
 
 
 
 
轉(zhuǎn)速(r/min)?
 
 
 
 
離心力(xg)?
 
 
 
 
時(shí)間?
 
 
 
 
溫度?
 
 
 
 
升 / 降速曲線?
 
 
 
 
菌體收集?
 
 
 
 
沉淀大腸桿菌?
 
 
 
 
4000?
 
 
 
 
2250?
 
 
 
 
10min?
 
 
 
 
室溫?
 
 
 
 
曲線 3 / 曲線 5?
 
 
 
 
蛋白去除?
 
 
 
 
分離酚 - 氯仿相?
 
 
 
 
12000?
 
 
 
 
13800?
 
 
 
 
5min?
 
 
 
 
4℃?
 
 
 
 
曲線 6 / 曲線 8?
 
 
 
 
核酸沉淀?
 
 
 
 
收集 DNA 沉淀?
 
 
 
 
12000?
 
 
 
 
13800?
 
 
 
 
5min?
 
 
 
 
4℃?
 
 
 
 
曲線 6 / 曲線 10?
 
 
 
 
 
 
 
 
 
?
2. 標(biāo)準(zhǔn)化操作流程?
  1. 樣品預(yù)處理:將 20mL 菌液移入 50mL 離心管,按參數(shù)表完成菌體收集,棄上清后用 SE 緩沖液重懸沉淀。加入 2mL 20% SDS 與 10mg 溶菌酶,37℃保溫 30min 至菌體裂解。?
  1. 離心操作?
  • 向裂解液中加入等體積氯仿 - 異戊醇(24:1),輕輕顛倒混勻(避免劇烈振蕩導(dǎo)致 DNA 斷裂),裝入離心管并配平(重量差<0.1g);?
  • 打開 DLG-160AT 電源,點(diǎn)擊 “程序” 鍵選擇自定義模式,輸入上表參數(shù),確認(rèn)后閉合門蓋,按下 “啟動(dòng)” 鍵;?
  • 離心結(jié)束后(蜂鳴提示),待轉(zhuǎn)子完全停轉(zhuǎn)(轉(zhuǎn)速顯示 “0”),打開門蓋取出離心管,小心吸取上層水相(含核酸),避免觸及中間蛋白層。?
  1. 關(guān)鍵質(zhì)控:通過紫外分光光度計(jì)檢測核酸純度,A260/A280 比值應(yīng)在 1.8-2.0 之間,表明無蛋白污染,分離成功率≥95%。?
(二)細(xì)胞分離場景:溫和離心下的活性保持?
動(dòng)物細(xì)胞、細(xì)菌等活體細(xì)胞對(duì)離心力敏感,需通過調(diào)節(jié)升 / 降速曲線減少機(jī)械損傷,DLG-160AT 的柔性轉(zhuǎn)速控制可有效保護(hù)細(xì)胞活性。?
1. 適配參數(shù)配置?
?
細(xì)胞類型?
 
 
 
 
分離目的?
 
 
 
 
轉(zhuǎn)速(r/min)?
 
 
 
 
離心力(xg)?
 
 
 
 
時(shí)間?
 
 
 
 
溫度?
 
 
 
 
升 / 降速曲線(柔和型)?
 
 
 
 
哺乳動(dòng)物細(xì)胞?
 
 
 
 
收集細(xì)胞沉淀?
 
 
 
 
1000?
 
 
 
 
280?
 
 
 
 
5min?
 
 
 
 
4℃?
 
 
 
 
曲線 1 / 曲線 10?
 
 
 
 
細(xì)菌細(xì)胞?
 
 
 
 
菌體富集?
 
 
 
 
5000?
 
 
 
 
2810?
 
 
 
 
8min?
 
 
 
 
室溫?
 
 
 
 
曲線 2 / 曲線 8?
 
 
 
 
紅細(xì)胞?
 
 
 
 
去除紅細(xì)胞?
 
 
 
 
3000?
 
 
 
 
980?
 
 
 
 
10min?
 
 
 
 
4℃?
 
 
 
 
曲線 1 / 曲線 9?
 
 
 
 
 
 
 
 
 
?
2. 標(biāo)準(zhǔn)化操作流程?
  1. 樣品制備:將細(xì)胞懸液移入 50mL 離心管,用培養(yǎng)基補(bǔ)足至 20mL,對(duì)稱放置于轉(zhuǎn)子中(確保配平),避免離心管觸碰轉(zhuǎn)子壁。?
  1. 離心操作?
  • 選擇 “溫和模式” 程序,設(shè)定上述參數(shù),升速曲線選用最慢的曲線 1(避免細(xì)胞因快速加速貼壁過緊),降速曲線選用曲線 10(緩慢減速防止沉淀松散);?
  • 啟動(dòng)設(shè)備后,通過液晶屏實(shí)時(shí)監(jiān)控轉(zhuǎn)速與溫度,若溫度偏離設(shè)定值 ±1℃,設(shè)備將自動(dòng)調(diào)節(jié)制冷系統(tǒng)(需選配制冷功能)。?
  1. 活性驗(yàn)證:離心后棄上清,用 PBS 緩沖液重懸細(xì)胞,加入臺(tái)盼藍(lán)染色,顯微鏡下計(jì)數(shù)活細(xì)胞率,應(yīng)≥90%(哺乳動(dòng)物細(xì)胞),表明離心過程未造成顯著損傷。?
(三)蛋白純化場景:梯度離心下的組分分離?
蛋白質(zhì)分離常需通過差速離心去除雜質(zhì),DLG-160AT 的可編程功能可實(shí)現(xiàn)多步驟連續(xù)離心,提高純化效率。?
1. 適配參數(shù)配置(以血清蛋白分離為例)?
?
步驟?
 
 
 
 
分離目的?
 
 
 
 
轉(zhuǎn)速(r/min)?
 
 
 
 
離心力(xg)?
 
 
 
 
時(shí)間?
 
 
 
 
溫度?
 
 
 
 
1?
 
 
 
 
去除細(xì)胞碎片?
 
 
 
 
3000?
 
 
 
 
980?
 
 
 
 
10min?
 
 
 
 
4℃?
 
 
 
 
2?
 
 
 
 
沉淀球蛋白?
 
 
 
 
12000?
 
 
 
 
13800?
 
 
 
 
20min?
 
 
 
 
4℃?
 
 
 
 
3?
 
 
 
 
純化白蛋白?
 
 
 
 
16000?
 
 
 
 
23669?
 
 
 
 
30min?
 
 
 
 
4℃?
 
 
 
 
 
 
 
 
 
?
2. 標(biāo)準(zhǔn)化操作流程?
  1. 連續(xù)離心設(shè)置:在 DLG-160AT 上創(chuàng)建 “蛋白純化” 程序組,依次輸入三步參數(shù),設(shè)置 “連續(xù)運(yùn)行” 模式,實(shí)現(xiàn)自動(dòng)切換步驟。?
  1. 操作要點(diǎn):第一步離心后取出上清(棄沉淀),直接進(jìn)行第二步離心;第二步離心后收集沉淀(含球蛋白),上清繼續(xù)第三步離心,最終收集白蛋白沉淀。全程在 4℃環(huán)境下操作,防止蛋白變性。?
  1. 純度檢測:通過 SDS-PAGE 電泳檢測純化產(chǎn)物,目的蛋白條帶清晰,雜帶≤2 條,表明分離效果達(dá)標(biāo)。?
三、質(zhì)量控制與風(fēng)險(xiǎn)管控:保障分離結(jié)果可靠性?
依托 DLG-160AT 的安全設(shè)計(jì)與標(biāo)準(zhǔn)化操作,建立 “過程監(jiān)控 - 結(jié)果驗(yàn)證 - 應(yīng)急處理” 質(zhì)控體系,降低實(shí)驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn)。?
(一)過程監(jiān)控關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)?
  1. 配平監(jiān)控:每次離心前必須用電子天平稱量離心管(含樣品),重量差嚴(yán)格控制在 0.1g 以內(nèi),避免觸發(fā)不平衡報(bào)警(設(shè)備停機(jī)保護(hù)),同時(shí)防止轉(zhuǎn)子磨損。?
  1. 參數(shù)鎖定:關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)參數(shù)(如核酸提取的 12000r/min 離心)設(shè)置后,點(diǎn)擊 “鎖定” 鍵禁止修改,防止誤觸導(dǎo)致參數(shù)變更,尤其適用于多人共用場景。?
  1. 異常預(yù)警處理?
  • 若運(yùn)行中顯示 “ERR-02”(超速),立即按下 “停止” 鍵,檢查轉(zhuǎn)速設(shè)定是否超過轉(zhuǎn)子上限(6×50mL 轉(zhuǎn)子最高 16000r/min);?
  • 若出現(xiàn) “ERR-04”(溫度故障),關(guān)閉電源并聯(lián)系售后,禁止強(qiáng)制運(yùn)行。?
(二)結(jié)果驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)?
?
樣品類型?
 
 
 
 
純度標(biāo)準(zhǔn)?
 
 
 
 
回收率標(biāo)準(zhǔn)?
 
 
 
 
重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)?
 
 
 
 
基因組 DNA?
 
 
 
 
A260/A280=1.8±0.1?
 
 
 
 
≥80%?
 
 
 
 
多次分離 CV 值≤5%?
 
 
 
 
哺乳動(dòng)物細(xì)胞?
 
 
 
 
活細(xì)胞率≥90%?
 
 
 
 
≥95%?
 
 
 
 
細(xì)胞計(jì)數(shù) CV 值≤3%?
 
 
 
 
血清白蛋白?
 
 
 
 
電泳純(單一條帶)?
 
 
 
 
≥70%?
 
 
 
 
純度 CV 值≤2%?
 
 
 
 
 
 
 
 
 
?
(三)安全風(fēng)險(xiǎn)防控?
  1. 生物安全:處理含病原體的樣品時(shí),使用帶螺旋蓋的離心管(加墊密封),離心后在生物安全柜內(nèi)打開,避免氣溶膠擴(kuò)散;若樣品泄漏,立即用 75% 乙醇擦拭內(nèi)腔,并用紫外燈消毒 30min。?
  1. 機(jī)械安全:離心過程中禁止打開門蓋(電子門鎖強(qiáng)制鎖定),待轉(zhuǎn)子完全停轉(zhuǎn)后再操作;嚴(yán)禁使用破損離心管,防止高速旋轉(zhuǎn)時(shí)爆裂。?
四、設(shè)備維護(hù)與壽命延長:全周期保養(yǎng)規(guī)范?
DLG-160AT 的維護(hù)需遵循 “日常清潔 - 定期校準(zhǔn) - 長期保養(yǎng)” 原則,結(jié)合其 FDA 認(rèn)證的食品級(jí)密封設(shè)計(jì),確保設(shè)備合規(guī)運(yùn)行。?
(一)日常維護(hù)(每日使用后)?
  1. 清潔:用無絨布蘸中性洗滌劑擦拭設(shè)備表面,去除樣品殘留;若內(nèi)腔有液體濺出,立即用吸水紙吸干,再用 75% 乙醇棉球擦拭消毒,防止滋生細(xì)菌。?
  1. 部件保養(yǎng):取出轉(zhuǎn)子,用干燥軟布擦拭轉(zhuǎn)子腔與主軸,涂抹專用硅脂(每 3 個(gè)月一次);密封圈用去離子水沖洗后晾干,避免變形老化。?
  1. 關(guān)機(jī)規(guī)范:關(guān)閉設(shè)備電源,拔下插頭,打開門蓋通風(fēng) 30min,去除內(nèi)腔濕氣,延長電子元件壽命。?
(二)定期維護(hù)(每 3 個(gè)月)?
  1. 精度校準(zhǔn)?
  • 轉(zhuǎn)速校準(zhǔn):使用標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)速計(jì)檢測 5000r/min、10000r/min、16000r/min 三檔轉(zhuǎn)速,偏差超 ±30r/min 需校準(zhǔn);?
  • 時(shí)間校準(zhǔn):設(shè)定 10min、30min 兩個(gè)檔位,實(shí)測誤差應(yīng)<2 秒。?
  1. 轉(zhuǎn)子檢查:用放大鏡觀察轉(zhuǎn)子表面有無裂紋、腐蝕痕跡,檢查離心管孔是否磨損,若存在缺陷立即停用(轉(zhuǎn)子屬易損件,建議每 2 年更換一次)。?
  1. 電氣系統(tǒng)檢查:檢查電源線有無破損,插頭接地是否良好,散熱孔是否通暢(用壓縮空氣吹去灰塵),確保電機(jī)散熱正常。?
(三)長期閑置保養(yǎng)(超過 1 個(gè)月)?
  1. 取出轉(zhuǎn)子,單獨(dú)存放于干燥盒中(墊硅膠干燥劑);?
  1. 設(shè)備內(nèi)腔放置防潮劑,關(guān)閉門蓋并貼 “閑置中” 標(biāo)簽;?
  1. 每月開機(jī)運(yùn)行一次(空轉(zhuǎn) 5min),激活電機(jī)與電子元件,防止老化。?
五、方案落地保障與合規(guī)性說明?
本方案嚴(yán)格符合《實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)安全操作規(guī)范》(GB/T 30118-2013)及 GMP 認(rèn)證要求,DLG-160AT 的食用級(jí)密封圈與無泄漏設(shè)計(jì)可滿足生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)施時(shí)需做好:?
  1. 人員培訓(xùn):重點(diǎn)考核參數(shù)設(shè)置、配平操作及應(yīng)急處理,培訓(xùn)合格后方可獨(dú)立操作;?
  1. 記錄追溯:建立《設(shè)備使用臺(tái)賬》,詳細(xì)記錄每次使用的樣品類型、參數(shù)、結(jié)果及維護(hù)情況,保存期≥2 年;?
  1. 耗材適配:必須使用與轉(zhuǎn)子匹配的離心管(耐受 16000r/min 離心力),推薦使用原廠耗材,避免因適配不良導(dǎo)致事故。?
六、總結(jié)?
德雷特 DLG-160AT 的標(biāo)準(zhǔn)化應(yīng)用方案,通過 “設(shè)備精準(zhǔn)適配 - 場景參數(shù)優(yōu)化 - 全流程質(zhì)控 - 定期維護(hù)” 的閉環(huán)管理,可有效提升生物樣品分離效率與結(jié)果可靠性。在核酸提取中實(shí)現(xiàn)純度達(dá)標(biāo)率≥95%,在細(xì)胞分離中保障活細(xì)胞率≥90%,同時(shí)延長設(shè)備使用壽命(規(guī)范維護(hù)下可達(dá) 5 年以上)。該方案兼顧操作性與合規(guī)性,為臨床醫(yī)學(xué)、生物科研等領(lǐng)域的樣品分離提供了可直接落地的實(shí)踐指南。?

 

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