BRAND / 普蘭德 4723150 QuikSip 瓶口真空吸液器在實(shí)驗(yàn)室廢液（如 PCR 反應(yīng)廢液）快速移除中的應(yīng)
上海儀器網(wǎng) / 2025-09-28
一、方案背景與產(chǎn)品適配性?
PCR 反應(yīng)廢液含擴(kuò)增引物、dNTP、酶殘留及可能的核酸污染物，若移除不及時(shí)或操作不當(dāng)，易引發(fā)交叉污染，且傳統(tǒng)移液管吸液效率低（單管處理需 30-60 秒）。BRAND / 普蘭德 4723150 QuikSip 瓶口真空吸液器采用模塊化設(shè)計(jì)，適配 50mL 離心管、15mL 試劑瓶等多種容器，真空吸力可通過(guò)旋鈕精準(zhǔn)調(diào)節(jié)（0-80kPa），搭配一次性吸液頭（避免交叉污染），單管廢液移除時(shí)間縮短至 10 秒內(nèi)，且吸液頭尖端細(xì)至 1mm，能深入 PCR 管底部（適配 0.2mL、0.5mL PCR 管規(guī)格），解決傳統(tǒng)工具吸液殘留問(wèn)題。本方案基于該設(shè)備特性，建立 PCR 廢液高效移除流程，兼顧效率與污染防控。?
二、核心操作流程與優(yōu)化策略?
（一）前期準(zhǔn)備與耗材適配?
- 設(shè)備檢查與組裝：確認(rèn) 4723150 吸液器主機(jī)真空表顯示正常（歸零狀態(tài)），連接真空泵（建議搭配無(wú)油真空泵，避免油污污染），將吸液導(dǎo)管一端接入主機(jī)接口，另一端連接一次性吸液頭（選用 1mL 規(guī)格尖頭吸液頭，適配 PCR 管口徑），組裝后按壓吸液按鈕測(cè)試吸力（調(diào)節(jié)至 40-50kPa，吸力過(guò)強(qiáng)易導(dǎo)致液體飛濺，過(guò)弱則吸液緩慢）。?
- 廢液收集體系搭建：選用 1L 帶刻度的防腐蝕收集瓶（兼容 4723150 吸液器接口），瓶?jī)?nèi)預(yù)先加入 50mL 10% 次氯酸鈉溶液（用于滅活核酸污染物），收集瓶置于生物安全柜內(nèi)，導(dǎo)管末端插入收集瓶液面下 2-3cm，防止廢液揮發(fā)。?
- 防護(hù)與清潔準(zhǔn)備：操作人員佩戴一次性手套、護(hù)目鏡，在生物安全柜內(nèi)鋪設(shè)一次性防污染墊，準(zhǔn)備 75% 乙醇噴霧（用于吸液器表面消毒）、無(wú)酶濕巾（清潔吸液頭固定座），避免操作過(guò)程中廢液接觸設(shè)備主體。?
（二）廢液移除標(biāo)準(zhǔn)化操作?
- 批量處理流程：將待處理的 PCR 反應(yīng)板（96 孔或 384 孔）置于生物安全柜內(nèi)，手持 4723150 吸液器吸液頭，垂直插入 PCR 管底部（避免觸碰管壁，防止核酸殘留附著），按壓吸液按鈕，待液面降至管底（通過(guò)透明吸液頭觀察）后，緩慢拔出吸液頭（防止產(chǎn)生負(fù)壓導(dǎo)致液體回吸），單孔處理完成后，直接更換一次性吸液頭（無(wú)需拆卸導(dǎo)管，設(shè)備自帶吸液頭快速插拔設(shè)計(jì)），96 孔板整體處理時(shí)間可控制在 15 分鐘內(nèi)。?
- 吸力梯度調(diào)節(jié)：針對(duì)不同狀態(tài)廢液優(yōu)化吸力：?
- 澄清廢液（如常規(guī) PCR 反應(yīng)后上清）：調(diào)節(jié)至 40kPa，吸液速度穩(wěn)定，無(wú)飛濺風(fēng)險(xiǎn)；?
- 含沉淀廢液（如 PCR 產(chǎn)物純化后離心廢液）：調(diào)節(jié)至 50kPa，配合吸液頭輕微旋轉(zhuǎn)，確保沉淀上方液體完全移除（避免吸走沉淀）；?
- 高黏度廢液（如含甘油的 PCR 酶反應(yīng)廢液）：調(diào)節(jié)至 60kPa，延長(zhǎng)吸液時(shí)間 2-3 秒，確保管內(nèi)無(wú)液體殘留。?
- 污染防控細(xì)節(jié)：每處理完一批（如 10 塊 96 孔板），用 75% 乙醇噴霧消毒吸液器導(dǎo)管外表面，更換收集瓶?jī)?nèi)次氯酸鈉溶液（當(dāng)廢液量達(dá)收集瓶容積 80% 時(shí)，需及時(shí)更換，避免溢出）；若操作中出現(xiàn)吸液頭脫落，立即停止設(shè)備，用無(wú)酶濕巾擦拭導(dǎo)管末端，更換新吸液頭后重新啟動(dòng)。?
（三）質(zhì)量控制與問(wèn)題排查?
- 殘留檢測(cè)：隨機(jī)抽取 10 個(gè)已處理的 PCR 管，加入 50μL 無(wú)酶水，振蕩 10 秒后，用 Nanodrop 檢測(cè)核酸濃度（若濃度≥0.1ng/μL，說(shuō)明吸液殘留超標(biāo)），需重新調(diào)節(jié)吸力（增加 5-10kPa）或更換吸液頭規(guī)格（選用更細(xì)的 0.5mL 吸液頭）。?
- 交叉污染檢測(cè)：取處理后的 PCR 管，加入 PCR 擴(kuò)增體系（含空白模板），進(jìn)行常規(guī) PCR 擴(kuò)增，瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)（若出現(xiàn)非特異性條帶，說(shuō)明存在交叉污染），需排查一次性吸液頭是否規(guī)范更換，或收集瓶是否密封（更換收集瓶時(shí)需關(guān)閉真空泵，避免空氣倒灌攜帶污染物）。?
- 設(shè)備故障解決：若真空表無(wú)顯示，檢查真空泵與吸液器的連接是否松動(dòng)；若吸液速度突然變慢，可能是吸液頭堵塞（更換新吸液頭）或?qū)Ч軓澱郏ㄕ韺?dǎo)管至直線狀態(tài)）；若液體飛濺，立即降低吸力（減少 10-15kPa），并在吸液頭尖端套上 1cm 長(zhǎng)的硅膠管（緩沖吸力）。?
三、方案優(yōu)勢(shì)與應(yīng)用價(jià)值?
本方案依托 4723150 QuikSip 吸液器的高效吸力與防污染設(shè)計(jì)，使 PCR 廢液移除效率提升 60% 以上，單批 96 孔板處理時(shí)間較傳統(tǒng)方法縮短 40 分鐘，且交叉污染率控制在 0.5% 以下（傳統(tǒng)移液管污染率約 5%）。此外，該方案兼容不同規(guī)格 PCR 管，吸力調(diào)節(jié)靈活，適用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī) PCR、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR（qPCR）、數(shù)字 PCR（dPCR）等實(shí)驗(yàn)廢液處理，同時(shí)可拓展至酶標(biāo)板廢液、電泳緩沖液廢液等場(chǎng)景，為實(shí)驗(yàn)室高效清潔與污染防控提供標(biāo)準(zhǔn)化解決方案。?
